{"id":6983,"date":"2022-04-11T11:24:14","date_gmt":"2022-04-11T02:24:14","guid":{"rendered":"https:\/\/c-mng.cwh.hokudai.ac.jp\/cp.med\/Root\/?page_id=6983"},"modified":"2022-12-20T15:43:10","modified_gmt":"2022-12-20T06:43:10","slug":"research","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/c-mng.cwh.hokudai.ac.jp\/cp.med\/Root\/research.html","title":{"rendered":"\u7814\u7a76"},"content":{"rendered":"

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\u7528\u8a9e\u96c6<\/h1>\n

\u5f53\u7814\u7a76\u5ba4\u306e\u7814\u7a76\u3092\u7406\u89e3\u3059\u308b\u52a9\u3051\u306b\u306a\u308b\u3001\u3042\u308b\u3044\u306f\u3088\u304f\u4f7f\u308f\u308c\u308b\u5358\u8a9e\u306e\u3068\u305d\u306e\u89e3\u8aac\u3092\u307e\u3068\u3081\u307e\u3057\u305f\u3002<\/p>\n

\u7d30\u80de\u5185\u30b7\u30b0\u30ca\u30eb\u4f1d\u9054<\/h2>\n

\u7d30\u80de\u30b7\u30b0\u30ca\u30eb\u4f1d\u9054\u306f\u4e00\u822c\u306b\u3001\u7d30\u80de\u8868\u9762\u306e\u53d7\u5bb9\u4f53\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u306b\u30ea\u30ac\u30f3\u30c9\u7269\u8cea\u304c\u7d50\u5408\u3059\u308b\u3053\u3068\u3067\u5f15\u304d\u8d77\u3053\u3055\u308c\u307e\u3059\u3002\u3053\u308c\u3092\u5f15\u304d\u91d1\u306b\u3001\u7d30\u80de\u5185\u3067\u9023\u7d9a\u7684\u306b\u5206\u5b50\u9593\u76f8\u4e92\u4f5c\u7528\u304c\u8d77\u3053\u308a\u3001\u30b7\u30b0\u30ca\u30eb\u304c\u79e9\u5e8f\u6b63\u3057\u304f\u5897\u5e45\u30fb\u4f1d\u9054\u3055\u308c\u3066\u3044\u304d\u307e\u3059\u3002\u305d\u306e\u7d50\u679c\u3001\u7d30\u80de\u5185\u5916\u306b\u5b58\u5728\u3059\u308b\u7279\u7570\u7684\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u306e\u7ffb\u8a33\u5f8c\u4fee\u98fe\u3084\u69cb\u9020\u5909\u5316\u306a\u3069\u304c\u751f\u3058\u3001\u305d\u306e\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u306e\u6d3b\u6027\u3084\u6a5f\u80fd\u304c\u5909\u5316\u3057\u307e\u3059\u3002\u3064\u307e\u308a\u3001\u7d30\u80de\u5185\u30b7\u30b0\u30ca\u30eb\u4f1d\u9054\u304c\u79e9\u5e8f\u6b63\u3057\u304f\u6642\u9593\u7684\u30fb\u7a7a\u9593\u7684\u306b\u53b3\u5bc6\u306b\u5236\u5fa1\u3055\u308c\u308b\u3053\u3068\u3067\u3001\u907a\u4f1d\u5b50\u767a\u73fe\u5236\u5fa1\u3084\u7d30\u80de\u5f62\u614b\u306e\u5909\u5316\u306a\u3069\u306e\u8868\u73fe\u5f62\u304c\u898f\u5b9a\u3055\u308c\u3001\u6700\u7d42\u7684\u306b\u306f\u751f\u4f53\u53cd\u5fdc\u304c\u5236\u5fa1\u3055\u308c\u3066\u3044\u308b\u306e\u3067\u3059\u3002<\/p>\n

\u86cd\u5149\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea<\/h2>\n

\u7dd1\u8272\u86cd\u5149\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\uff08green fluorescent protein, GFP\uff09\u306f\u3001\u30aa\u30ef\u30f3\u30af\u30e9\u30b2\u306e\u767a\u5149\u5668\u5b98\u304b\u3089\u5358\u96e2\u3055\u308c\u305f\u300c\u5149\u308b\u300d\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u3067\u3059\u30021992\u5e74\u306b\u305d\u306ecDNA\u304c\u30af\u30ed\u30fc\u30cb\u30f3\u30b0\u3055\u308c\u3066\u4ee5\u6765\u3001\u5404\u7a2e\u7d30\u80de\u306b\u86cd\u5149\u7269\u8cea\u3092\u5c0e\u5165\u3067\u304d\u308b\u3088\u3046\u306b\u306a\u308a\u307e\u3057\u305f\u3002\u7d30\u80de\u5185\u306e\u30c0\u30a4\u30ca\u30df\u30c3\u30af\u306a\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u52d5\u614b\u3084\u74b0\u5883\u5909\u5316\u306e\u53ef\u8996\u5316\u306b\u6c4e\u7528\u3055\u308c\u3066\u3044\u307e\u3059\u3002 \u306a\u304a\u3001\u3053\u306e\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u306e\u767a\u898b\u3068\u5fdc\u7528\u306b\u3088\u3063\u3066\u3001\u4e0b\u6751\u8129\u535a\u58eb\u306f2008\u5e74\u3001\u65e5\u672c\u4eba\u3067\uff15\u4eba\u76ee\u3068\u306a\u308b\u30ce\u30fc\u30d9\u30eb\u5316\u5b66\u8cde\u3092\u53d7\u8cde\u3055\u308c\u307e\u3057\u305f\u3002<\/p>\n

FRET<\/h2>\n

\u30d5\u30a7\u30eb\u30b9\u30bf\u30fc\u306e\u5171\u9cf4\u30a8\u30cd\u30eb\u30ae\u30fc\u79fb\u52d5\uff08F\u00f6rster resonance energy transfer, FRET\uff09\u306f\u3001\u4e8c\u3064\u306e\u86cd\u5149\u5206\u5b50\u9593\u3067\u30a8\u30cd\u30eb\u30ae\u30fc\u304c\u79fb\u52d5\u3059\u308b\u73fe\u8c61\u3067\u3059\u3002GFP\u306e\u5909\u7570\u4f53\u3092\u7528\u3044\u308b\u5834\u5408\u306b\u306f\u30b7\u30a2\u30f3\u8272\u306e\u5909\u7570\u4f53\uff08\u3042\u308b\u3044\u306f\u5358\u306b\u30b7\u30a2\u30f3\u8272\u86cd\u5149\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8ceacyan fluorescent protein, CFP\uff09\u3068\u9ec4\u8272\u5909\u7570\u4f53\uff08YFP\uff09\u304c\u3088\u304f\u7528\u3044\u3089\u308c\u3001CFP\u3068YFP\u304c\u8fd1\u63a5\u3057\u305f\u5834\u5408\u306b\u306e\u307fCFP\u304b\u3089YFP\u3078\u306eFRET\u304c\u751f\u3058\u307e\u3059\uff08\u56f31\uff09\u3002\u751f\u304d\u305f\u7d30\u80de\u5185\u3067\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u9593\u76f8\u4e92\u4f5c\u7528\u3084\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u306e\u69cb\u9020\u5909\u5316\u3084\u6d3b\u6027\u5316\u3092\u3001\u9ad8\u611f\u5ea6\u304b\u3064\u5b9a\u91cf\u7684\u306b\u6e2c\u5b9a\u3059\u308b\u3053\u3068\u304c\u53ef\u80fd\u3067\u3059\u3002<\/p>\n

\"\"<\/a><\/p>\n

\u56f31\u3000FRET\u306e\u539f\u7406<\/strong> CFP\u306f\u901a\u5e38440 nm\u306e\u52b1\u8d77\u5149\u3067480 nm\u306e\u86cd\u5149\u3092\u767a\u3059\u308b\u3002\u3053\u3053\u306b\u30a8\u30cd\u30eb\u30ae\u30fc\u53d7\u5bb9\u4f53\u3067\u3042\u308bYFP\u304c\u8fd1\u63a5\u3057\u3066\u3044\u308b\u3068\u3001\u30a8\u30cd\u30eb\u30ae\u30fc\u9077\u79fb\u304c\u751f\u3058\u3001\u540c\u3058440 nm\u306e\u52b1\u8d77\u5149\u306b\u5bfe\u3057\u3066YFP\u306e\u86cd\u5149\uff08530 nm\uff09\u304c\u8a8d\u3081\u3089\u308c\u308b\u3002480\u3068530 nm\u306e\u86cd\u5149\u5f37\u5ea6\u6bd4\u3092\u6307\u6a19\u306bCFP\u3068YFP\u306e\u8ddd\u96e2\u3092\u77e5\u308b\u3053\u3068\u304c\u3067\u304d\u308b\u3002<\/p>\n

BiFC<\/h2>\n

EGFP\u306f240\u500b\u307b\u3069\u306e\u30a2\u30df\u30ce\u9178\u304b\u3089\u308a\u3001\u56f32\u306e\u5de6\u306e\u3088\u3046\u306a\u30d9\u30fc\u30bf\u30d0\u30ec\u30eb\u69cb\u9020\u3092\u3057\u3066\u3044\u307e\u3059\u3002\u305d\u308c\u3092\u9069\u5f53\u306a\u4f4d\u7f6e\u3067\u5207\u65ad\u3059\u308b\u3068\u5404\u3005\u306e\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u306f\u5149\u3092\u767a\u3057\u307e\u305b\u3093\uff08\u56f3\uff12\u5de6\uff09\u3002\u3057\u304b\u3057\u4e21\u8005\u304c\u7d50\u5408\u3057\u305f\u6642\u306f\u5b8c\u5168\u306a\u69cb\u9020\u304c\u5f62\u6210\u3055\u308c\u86cd\u5149\u3092\u767a\u3057\u307e\u3059\uff08\u56f3\uff12\u53f3\uff09\u3002\u3053\u308c\u304c\u3001\u86cd\u5149\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u518d\u69cb\u6210\u6cd5\uff08bimolecular fluorescence complementation, BiFC\uff09\u3067\u3059\u3002 \u76f8\u4e92\u4f5c\u7528\u3092\u8abf\u3079\u305f\u3044\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u306b\u305d\u308c\u305e\u308c\u3092\u7d50\u5408\u3059\u308b\u3053\u3068\u3067\u305d\u306e\u7d50\u5408\u3092\u89b3\u5bdf\u3059\u308b\u3053\u3068\u304c\u3067\u304d\u307e\u3059\u3002\u7d50\u5408\u306e\u5897\u52a0\u304c\u5358\u306b\u86cd\u5149\u5f37\u5ea6\u306e\u5897\u5f37\u3067\u691c\u51fa\u3067\u304d\u308b\u5358\u7d14\u3055\u304c\u3042\u308a\u3001GFP\u3092\u7528\u3044\u308c\u3070\u901a\u5e38\u306e\u86cd\u5149\u9855\u5fae\u93e1\u306b\u5099\u3048\u4ed8\u3051\u306eFITC\u30d5\u30a3\u30eb\u30bf\u30fc\u3060\u3051\u3067\u89b3\u5bdf\u53ef\u80fd\u3067\u3059\u3002\u307e\u305f\u3001\u76f8\u4e92\u4f5c\u7528\u304c\u5358\u8272\u3067\u691c\u51fa\u53ef\u80fd\u306a\u70b9\u306f\u9b45\u529b\u7684\u3067\u3001\u8907\u6570\u306e\u5206\u5b50\u9593\u76f8\u4e92\u4f5c\u7528\u306e\u540c\u6642\u89b3\u5bdf\u3082\u5bb9\u6613\u306b\u884c\u3048\u307e\u3059\u3002<\/p>\n

\"\"<\/a><\/p>\n

\u56f32 BiFC\u306b\u3088\u308b\u5206\u5b50\u9593\u76f8\u4e92\u4f5c\u7528\u306e\u691c\u51fa\u539f\u7406<\/strong> \u86cd\u5149\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8ceaYFP\uff08Venus\uff09\u3092N\u672b\u3068C\u672b\u5074\u306b\u5206\u65ad\u3059\u308b\u3068\uff08\u56f3\u3067\u306f172-173\u30a2\u30df\u30ce\u9178\uff09\u3001\u86cd\u5149\u306f\u767a\u3057\u306a\u3044\u3002\u305d\u308c\u305e\u308c\u306b\u7d50\u5408\u304c\u671f\u5f85\u3055\u308c\u308b\u4e8c\u3064\u306e\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8ceaA\u3068B\u3092\u878d\u5408\u3059\u308b\u3002A\u3068B\u306e\u7d50\u5408\u304cVenus\u306e\u69cb\u9020\u306e\u518d\u69cb\u6210\u3092\u8d77\u3053\u3057\u86cd\u5149\u3092\u767a\u3059\u308b\u305f\u3081\u3001\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u9593\u76f8\u4e92\u4f5c\u7528\u304c\u86cd\u5149\u5f37\u5ea6\u306e\u5897\u52a0\u3068\u3057\u3066\u89b3\u5bdf\u3055\u308c\u308b\u3002<\/p>\n

\u30a8\u30f3\u30c9\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9<\/h2>\n

\u30a8\u30f3\u30c9\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9\u306f\u7d30\u80de\u5916\u306e\u7269\u8cea\u3092\u7d30\u80de\u5185\u306b\u53d6\u308a\u8fbc\u3080\u4ed5\u7d44\u307f\u3067\u3059\u3002\u30a8\u30f3\u30c9\u30bd\u30fc\u30e0\u819c\u306e\u69cb\u6210\u6210\u5206\u3084\u305d\u306e\u5f62\u6210\u6a5f\u69cb\u306b\u3088\u3063\u3066\u3001\u30af\u30e9\u30b9\u30ea\u30f3\u4f9d\u5b58\u6027\u30a8\u30f3\u30c9\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9\uff08\u53d7\u5bb9\u4f53\u578b\u30a8\u30f3\u30c9\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9\u3068\u547c\u3070\u308c\u308b\u3053\u3068\u3082\u3042\u308a\u307e\u3059\uff09\u3001\u30ab\u30d9\u30aa\u30e9\u578b\u30a8\u30f3\u30c9\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9\u3001\u30af\u30e9\u30b9\u30ea\u30f3\u975e\u4f9d\u5b58\u6027\u30a8\u30f3\u30c9\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9\u7b49\u306b\u5206\u985e\u3055\u308c\u307e\u3059\u3002\u30af\u30e9\u30b9\u30ea\u30f3\u4f9d\u5b58\u6027\u30a8\u30f3\u30c9\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9\u306f\u3001\u4e3b\u306b\u30ea\u30ac\u30f3\u30c9\u3068\u7d50\u5408\u3057\u305f\u53d7\u5bb9\u4f53\u304c\u7d30\u80de\u5185\u306b\u53d6\u308a\u8fbc\u307e\u308c\u308b\u305f\u3081\u306e\u6a5f\u69cb\u3067\u3059\u3002\u53d6\u308a\u8fbc\u307e\u308c\u305f\u5c0f\u80de\u306f\u30af\u30e9\u30b9\u30ea\u30f3\u304c\u8131\u88ab\u8986\u5316\u3057\u305f\u5f8c\u306b\u5c0f\u80de\u540c\u58eb\u304c\u878d\u5408\u3057\u3066\u521d\u671f\u30a8\u30f3\u30c9\u30bd\u30fc\u30e0\u3068\u306a\u308a\u307e\u3059\u3002\u305d\u306e\u5f8c\u3001\u4e00\u90e8\u306f\u5f8c\u671f\u30a8\u30f3\u30c9\u30bd\u30fc\u30e0\u3001\u30ea\u30bd\u30bd\u30fc\u30e0\u3078\u3068\u9032\u3080\u5206\u89e3\u7d4c\u8def\u3001\u4e00\u90e8\u306f\u30ea\u30b5\u30a4\u30af\u30ea\u30f3\u30b0\u30a8\u30f3\u30c9\u30bd\u30fc\u30e0\u3078\u3068\u9032\u3080\u518d\u5229\u7528\u7d4c\u8def\u3078\u3068\u904b\u547d\u3092\u5206\u304b\u3061\u307e\u3059\u3002\u30ab\u30d9\u30aa\u30e9\u578b\u30a8\u30f3\u30c9\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9\u306f\u3001\u7d30\u80de\u819c\u5185\u8449\u306e\u30b3\u30ec\u30b9\u30c6\u30ed\u30fc\u30eb\u3068\u306e\u7d50\u5408\u3092\u4ecb\u3057\u3066\u81ea\u5df1\u4f1a\u5408\u3057\u305f\u30ab\u30d9\u30aa\u30ea\u30f3\u304c\u304f\u307c\u307f\u69cb\u9020\uff08\u30ab\u30d9\u30aa\u30e9\uff09\u3092\u5f62\u6210\u3057\u307e\u3059\u3002\u30af\u30e9\u30b9\u30ea\u30f3\u975e\u4f9d\u5b58\u6027\u30a8\u30f3\u30c9\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9\u306f\u3001\u30af\u30e9\u30b9\u30ea\u30f3\u3084\u30ab\u30d9\u30aa\u30e9\u578b\u30a8\u30f3\u30c9\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9\u3068\u306f\u7570\u306a\u308a\u88ab\u8986\u5c0f\u80de\u3092\u5f62\u6210\u305b\u305a\u306b\u7269\u8cea\u3092\u53d6\u308a\u8fbc\u307f\u307e\u3059\u3002\u30de\u30af\u30ed\u30d4\u30ce\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9\u3084\u30d5\u30a1\u30b4\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9\u7b49\u304c\u3053\u306e\u69d8\u5f0f\u306b\u542b\u307e\u308c\u307e\u3059\u3002<\/p>\n

 <\/p>\n

\u30b7\u30b0\u30ca\u30eb\u4f1d\u9054\u3068\u30a8\u30f3\u30c9\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9\u306e\u30a4\u30e1\u30fc\u30b8\u30f3\u30b0<\/h1>\n

Ras-PI3K\u30b7\u30b0\u30ca\u30eb\u306b\u3088\u308b\u30a8\u30f3\u30c9\u30b5\u30a4\u30c8\u30fc\u30b7\u30b9\u5236\u5fa1\u6a5f\u69cb<\/h2>\n

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\"ras_pi3k\"<\/a><\/p>\n

\u56f31\u3000Ras-PI3K\u8907\u5408\u4f53\u306f\u30a8\u30f3\u30c9\u30be\u30fc\u30e0\u306b\u5c40\u5728\u3059\u308b<\/strong> BiFC\u6cd5\u3092\u7528\u3044\u3066Ras\u3068\u6a19\u7684\u56e0\u5b50\u304c\u5f62\u6210\u3059\u308b\u8907\u5408\u4f53\u3092\u53ef\u8996\u5316\u3057\u305f\u3002Ras-PI3K\u8907\u5408\u4f53\u306f\u7d30\u80de\u819c\u3060\u3051\u3067\u306a\u304f\u3001\u30a8\u30f3\u30c9\u30be\u30fc\u30e0\u306b\u3082\u5c40\u5728\u3057\u305f\u3002<\/p>\n

\u3010\u95a2\u9023\u696d\u7e3e\u3011<\/strong><\/p>\n